Содержание
Химические соединения бромид цетилтриметиламмония, бромид гексадецилтриметиламмония, бромид пальмитилтриметиламмония и бромид цетримония также известны CTAB. Это химическое вещество используется для поддержания pH в последовательном геноме ДНК, особенно в растениях.
Формула ЦТАБ
Количество формул различных химических веществ CTAB различается в зависимости от лаборатории. Однако все ингредиенты включают 1 М Трис HCl, рН 8,0, 0,5 М ЭДТА, 5 М NaCl и H2O (иногда дважды дистиллированные). Для компонента CTAB некоторые лаборатории используют цетилтриметиламмонийбромид и другие гексадецилтриметиламмонийбромид.
Подготовка растительных тканей
Подготовка ткани растения может варьироваться в зависимости от материала. Стенки и клеточные мембраны должны быть сломаны, чтобы получить доступ к ядерному материалу без какой-либо деградации. Обычно при измельчении растительный материал с жидким азотом обеспечивает доступ к ДНК, сохраняя вредные клеточные ферменты и неактивные химические вещества.
Подвеска и центрифугирование
Измельченную ткань помещают на лезвие CTAB и вставляют в емкость с проточной водой. Затем его смешивают с хлороформом и центрифугируют для отделения растворимых белков и других материалов. Затем ДНК осаждается из водной фазы и тщательно промывается для удаления загрязняющих солей. Затем очищенную ДНК извлекают и хранят на предметном стекле TE или в стерильной дистиллированной воде.